粗蛋白的测定方法

【摘要】粗蛋白的定义就是饲料样品中的氮含量乘以系数6.25。大多数蛋白质一般都含16%的氮，该系数即由此推导而来，因此将饲料中氮的百分含量乘以100再除以16或者说乘以6.25，就可算出粗蛋白含量

粗蛋白测定原理

凯氏法测定试样中的含氮量，即在催化剂作用下，用硫酸破坏有机物，使含氮物转化成硫酸铵，加入强碱进行蒸馏使氨逸出，用硼酸吸收后，再用酸滴定，测出氮含量，将结果乘以换算系数6.25，计算出粗蛋白含量。

粗蛋白测定试剂

1、硫酸(GB625)：化学纯，含量为98%，无氮。

2、混合催化剂：0.4克硫酸铜，5个结晶水(GB665)，6克硫酸钾(HG3-920)或硫酸钠(HG3-908)，均为化学纯，磨碎混匀。

3、氢氧化钠(GB629)：化学纯，40%水溶液(m/V)。

4、硼酸(GB628)：化学纯，2%水溶液(m/V)。

5、混合指示剂：甲基红(HG3-958)0.1%乙醇溶液，溴甲酚绿(HG3-1220)0.5%乙醇溶液，两溶液等体积混合，在阴凉处保存期为三个月。

6、盐酸标准溶液：邻苯二甲酸氢钾法标定，按克B601制备。

①盐酸标准溶液：c(HCl)=0.1mol/L，8.3毫升盐酸(GB622，分析纯)，注入1000毫升蒸馏水中。

②盐酸标准溶液：c(HCl)=0.02mol/L，1.67毫升盐酸(GB622，分析纯)，注入1000毫升蒸馏水中。

7、蔗糖(HG3-1001)：分析纯。

8、硫酸铵(GB1396)：分析纯，干燥。

9、硼酸吸收液：1%硼酸水溶液1000毫升，加入0.1%溴甲酚绿乙醇溶液10毫升，0.1%甲基红乙醇溶液7毫升，4%氢氧化钠水溶液0.5毫升，混合，置阴凉处保存期为一个月(全自动程序用)。

粗蛋白测定仪器

1、实验室用样品粉碎机或研钵。

2、分样筛：孔径0.45毫米(40目)。

3、分析天平：感量0.0001克。

4、消煮炉或电炉。

5、滴定管：酸式，10、25毫升。

6、凯氏烧瓶：250毫升。

7、凯氏蒸馏装置：半微量水蒸气蒸馏式。

8、锥形瓶：150、250毫升。

9、容量瓶：100毫升。

10、消煮管：250毫升。

11、定氮仪：以凯氏原理制造的各类型半自动。