猪人工授精技术
【摘要】猪的人工授精研究是从公元1780年意大利生理学家司拜伦瑾尼第一次成功在地对狗进行人工授精试验后,直到19世纪末和本世纪初才对马试验成功,然后以用于牛羊猪及其他家畜。到二十世纪30年代,才初步形成一套较完整的操作方法,并从试验阶段进入到实用阶段,成为繁殖改良家畜的重要手段。
3、精液检查及品质评定
精液检查的目的在于鉴定精液品质的优劣,以便于进一步的处理或用于授精和保存。采精后应立即进行检查,检查要迅速、准确、全面及操作科学、规范。实际生产中,没有必要对每次的每头公猪的精液都进行精子形态检查,但应对新公猪的最初几次精液进行形态检查,以后每头公猪每半个月检测一次。
①感观检查
射精量:通常一头公猪的射精量为150~300毫升,但因品种、年龄、性准备情况以及采精方法、技术水平、采精频率和营养状况等差异很大,变化范围一般为50~500毫升。相应地也可以称量精液的重量(1克约等于1毫升)来衡定其射精量的大小。一般测定公猪的射精量时,不能仅凭一次的采精记录,应以一定时期内多次射精量总和的平均数为准。
颜色、气味:公猪的精液呈淡乳白或浅灰白色,精液乳白程度越浓,表明精子数量越多,如色泽异常,应检查其生殖器官是否有疾病。干净的精液只有一点气味,如受包皮的污染或精液品质异变,则气味很大。
②测PH值
猪的精液PH值为7.3~7.9,测定PH值最简单的方法是用万用试纸比色即可测得。
③活力的检查
活力的检查是精液品质检查的重要项目,活力用来测定精子的运动,活力检查包括评估直线运动的精子比例。操作方法为:用一经过预热到35℃的载玻片,用滴管吸一滴精液,再用盖玻片均匀地盖住液面,这样以便在检查这一薄层精子细胞时就能看到精液的清晰画面。用100或400倍的显微镜来检查并评定精子的活力(如下表),如果活力很差,就评分为0或1,评分为0或1的精液就应弃去。实际操作中为保证测定评估的准确,一般都有要重复检查一次。
精子密度的检查可采用估测法、精子计数法或利用精子的透光性(混浊度)测定。生产中常与检查精子活力时同步进行,在显微镜下根据精子稠密程度的不同,将精子密度粗略地分为“稠密”、“中等”、“稀薄”,简略为“密”、“中”、“稀”三级。镜检下,精子密集,精子间的距离不到1个精子长度,其密度就为“密”;若精子间能容纳1~2个精子,就为“中”;精子间间隙大,能容纳2个以上的精子,则为“稀”。这种评定,与精子活力的评定一样,需要有一定的评定经验,但简单易行,可初略的确定稀释倍数。另外也可利用比色计或分光光度计对精子密度进行准确测定,但设备投入昂贵,一般的生产场难以承受。
④精子形态的检查
精子形态正常与否与受胎率有着密切的关系,如果精液中含有大量的畸形精子,其受精能力就低。一般品质优良的猪精液,其畸形率应在18%以下,品质普通的精液精子畸形率也应不超过20%,如超过20%则表示精液品质不良,应弃去,不作输精用。“图四”为正常精子形态,“图五”为一些常见的畸形精子形态。
⑤其它检查
包括细菌学检查、精子染色涂片、精子存活时间等的检查,这些可根据各生产场的具体条件和生产规模等要求选择开展。
4、精液的稀释及保存
对精液进行品质检查后,为增加精液容量,以生产更多的输精头份,同时也为精液的保存提供良好的营养环境,应立即对精液进行稀释。
①稀释液的准备
可以配制多种适用的稀释液,其中几种相对比较复杂,需借助实验室技术来准备,一般只用于商业化人工授精站。生产中常用的是那些简单且只有一次混合的稀释液,可以购买已配备好的精液稀释液粉剂,按照说明书操作配制即可。比如BTS 、Guelph、 Kiev、 Merck、 Zorpva、 Reading、 Modena等稀释液,它们有的可保存3天,有的可保存5~7天,下表列举了一些稀释液的配方供大家参考。实际配制稀释液时应注意所用的各种化合物都必须是“分析纯”的,加入的蒸馏水必须纯净,条件允许的应用双蒸水稀释;各种物料都应准确称量,且一定要完全溶解,充分混合;稀释液最好是现配现用,最长也应在24小时内用完。
②精液的稀释
稀释精液要根据精子的密度按一定比例进行,如果对精子的密度有准确的测定,其稀释倍数则易于计算。但实际生产中,因投入成本等诸多因素考虑,常只能对精液密度进行“密”、“中”、“稀”的测评。在这种情况下稀释精液时,应控制稀释比例在1:4~1:10,最好控制在6~8头份内,即如果你有200毫升精液,其稀释后的精液容量不能超过1000毫升。且要保证一头份输精液内有1.5×109~6.0×109个精子,且其容量至少应在50毫升以上。最好保证稀释倍数8头份内,因为一头正常公猪一次射精的平均精子数为30~40×109个,变化范围为20~120×109个,如稀释倍数控制在8头份内,仍可确保有足够的精子来保证受精力。
如果精确测定过精子密度,则易于确定稀释倍数,例如测得某公猪精液的密度为2亿/ml,采精量为300ml,且计划稀释后密度为40亿/100ml头份,则此公猪精液可稀释300×2/40=15头份,即需加1500~300=1200ml稀释液。
在对精液进行烯释时,最重要的是在混合时,精液与稀释液的温度要相同,操作中一般都将稀释液加热并维持在36℃,且在稀释时尽量维持精液和稀释液为等温36℃,若有温差也一定要控制在1℃以内。稀释时将稀释液慢慢地倒入精液中充分混合,动作要轻慢,防止剧烈振荡。
③精液的保存
稀释后的精液要保存在恒温箱内,维持温度17~18℃,并每隔12小时轻轻摇动一次以防稀释液出现沉淀现象。生产中要切忌将精液保存在冰箱(2~8℃)或高于20℃的环境中。
人工授精操作技术
输精是人工授精的最后一个技术环节,只有适时准确地将一定量的优质精液输入发情母猪的生殖道内的适当部位,才能获得好的受胎率。
输精剂量不能太少,人工授精的正常剂量一般为30~50亿个精子/1个剂量,体积为80~100ML,美国一般采用30亿/80ML.头份,我国一般采用40亿左右/100ML.头份,不过,这主要是根据实际情况而定,与品种、输精人员的技术水平等密切相关。
实际生产中,为提高猪的受胎率,一般都采用两次输精,即第一次输精后,间隔8~24小时后再重复输精一次。对个别发情持续时间特别长的母猪,除了要细心观察其发情征状变化,掌握输精时机外,还采用多次输精的方法,即连续几天,每天输精一次,以增强其受胎几率。
对母猪进行输精前,还应对保存后的稀释精液进行检查,镜检精子的活力不低于0.5的精液方可用来输精,用于输精的器具必须严格清洁、消毒,从处理室到生产线,要用保温箱携带精液,以免外界温度过高或过低而使精子受到应激死亡。输精前,要对母猪外阴进行清洗、消毒。输精时间掌握在发情开始后的19~30小时左右,实际操作中,最佳输精时间掌握在母猪的盛情期。输精时先将输精管涂以少许稀释液使之润滑,然后向上、向前边逆时针方向旋转边插入,直至锁定在子宫颈内不能前进为止,再向外微微拉动一点,并缓慢地对输精瓶加压,将精液注入子宫内,输精时间的长短要与自然交配相近,约5~15分钟。输完后缓慢抽出输精管,并用手掌按压母猪腰荐结合部,防止精液倒流。

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猪的生理解剖图
猪内脏解剖图

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